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  • 식물분자생물학실험 Agrobacterium 매개 식물 형질전환 예비보고서

    목차

    1. 실험제목

    2. 작성일자

    3. 실험개요

    4. 목적/원리/이론/방법
    가) Agrobacterium 매개 형질전환 개관
    나) Agrobacterium에 대하여
    다) Agrobacterium 매개 형질전환 실험방법

    본문내용

    1 실험제목: Agrobacterium 매개 식물 형질전환

    2 작성일자: 2024.03.15

    3 실험개요: Agrobacterium을 매개체로 활용하여, 식물에 유전자를 도입하여 형질전환하는 방법에 대하여 학습한다.

    4 목적/원리/이론/방법:
    가) Agrobacterium 매개 형질전환 개관
    유전적 형질전환(Genetic transformation)이란 수용자 세포(recipient cell)가 외부 유전물질 을 받아들여 자신의 유전정보에 도입하는 과정을 통해 유전자의 변환이 일어나는 현상 을 칭한다. 형질전환은 다양한 미생물과 동식물을 상대로 인간에게 필요한 형질을 발현 시키거나(gain-of-function), 인간에게 필요치 않은 형질의 발현을 막기위한(loss-offunction) 연구방법으로 널리 활용되어 왔다.(2)
    식물의 유전자를 변형시키기 위한 방법으로 가장 널리 활용되고 있는 방법은 Agrobacterium 매개 형질전환(Agrobacterium-mediated plant genetic transformation)이다. 이는 박테리아가 자신의 genome에서 숙주 세포의 genome으로 특정 DNA 분자를 전달 하는 기작을 활용한 것이다.(5) Agrobacterium tumefaciens는 다수의 외떡잎 혹은 쌍떡잎 속씨식물들과 겉씨식물에 DNA를 전달할 수 있는 것으로 연구되어 있으며, 최근의 연구 에 따르면 곰팡이나 인간 세포의 형질전환도 가능한 것으로 보고되고 있어 넒은 범위의 유기체에서 형질 전환 벡터로 활용될 수 있다.(3)

    Agrobacterium-mediated plant genetic transformation의 기반은 Agrobacterium에 상주하 는 tumor-inducing (Ti) 또는 rhizogenic (Ri) plasmid이다. 여기에는 transferred DNA (TDNA)가 존재하는데, 이는 10~30k bp 정도의 크기를 지니는 영역이다.

    출처 : 해피캠퍼스

  • 식물분자생물학실험 Agrobacterium Transformation 결과보고서

    목차

    1. 실험제목

    2. 작성일자

    3. 실험개요

    4. 실험이론
    가) Agrobacterium competent cell (GV3101)이란
    나) Freeze-Thaw method란
    다) Binary bector란
    라) YEP Media란

    5. Materials and methods
    가) Materials
    나) Methods

    6. 실험결과

    7. Discussion

    본문내용

    가) Agrobacterium competent cell (GV3101)이란
    GV3101은 Agrobacterium tumefaciens Chemically Competent Cell의 일종으로, 애기장대, 담배, 옥수수, 감자 등의 식물을 형질 전환하는데 사용될 수 있다. 여기에는 screening을 위한 rifampicin resistant gene (rif )이 미리 포함되어 있으며, gentamicin resistance gene 과 vir gene을 포함한 Ti plasmid를 운반할 수 있다.(1)

    나) Freeze-Thaw method란
    Freeze-Thaw method는 Dityatkin et al.에 의하여 E.coli에 대한 연구를 통하여 1972년 처 음으로 제안된 방법으로 이 기술을 사용하면 DNA 분자가 cell wall과 membrane의 temporary lesions을 통해 passive diffusion을 통하여 동결-해동된 세포에 침투한다.(2)

    출처 : 해피캠퍼스