목차
1. Title
2. Purpose
3. Materials
4. Methods
5. Results
6. Discussions
7. Project
(1) 또 다른 cryoprotective agent (cryoprotectant)에는 어떤 것들이 있을까?
8. Reference
본문내용
4. Purpose
세포를 장기간 계대배양을 하게 되면 오염으로 인해 세포가 소실되거나 돌연변이가 생겨날 수 있다. 따라서 이를 대비하기 위해 미리 충분한 양의 세포를 확보하고, 장기간 안정하게 유지·보관할 수 있도록 cell stock을 만들어 동결 보존시킨다.
5. Materials
MCF-7 Cells (cultured in T25 flask), DPBS, 0.05% Trypsin-EDTA solution, Media (RPMI1640, FBS, P/S), DMSO, alcohol lamp, micropipette, tip, rack, beaker, 1.5㎖ ep-tube, cryogenic vial, 70% ethanol, tissue, incubator, centrifuge, clean bench, (2-propanol, cryo freezing container, liquid nitrogen container)
6. Methods
① 4℃에서 냉장보관 중이던 media를 37℃ water bath에서 충분히 pre-warmed.
② Clean bench에 넣기 전, pre-warmed media 및 필요한 실험기구들을 70% 에탄올로 소독한다. (Cell이 들어있는 flask는 에탄올로 소독하지 않고 clean bench로 옮겨준다.)
출처 : 해피캠퍼스