목차
I. 초록 (Abstract)
II. 도입-실험 배경 및 이론 (Introduction)
III. 실험방법 (Experimental)
IV. 결과 (Results)
1. 아데닌과 카페인의 분리
2. 파장대에 따른 흡광도 측정
3. 카페인 검정 곡선 도출 후 미지의 카페인 용액 농도 추정
V. 고찰 (Discussion)
VI. 결론 (Conclusion)
VII. 과제 (Assignment)
본문내용
I. 초록 (Abstract)
HPLC의 원리를 알고 역상 크로마토그래피를 통해 카페인과 아데닌의 용출시간 차이를 통해 극성 차이를 비교하며, 250nm부터 280nm 까지 10nm 간격으로 카페인과 아데닌의 혼합 용액의 흡광도를 측정해보며 최대 흡광 파장을 구해본다. 카페인을 각각 500μM, 375μM, 250μM, 125μM 표준 용액을 통해 검정선을 도출하며 커피의 농도를 구한다.
II. 도입-실험 배경 및 이론 (Introduction)
HPLC(High Performance Liquid Cromatography)는 이동상과 고정상의 극성 차이를 통해 혼합물을 분리하고 흡광도를 통해 정량분석해 주는 첨단기기이다. 분배의 원리에 따르면..
<중 략>
아데닌과 카페인의 경우 분자구조 차이에 의해 아데닌의 극성이 높아 이동상이 정지상보다 극성이 높은 역상 크로마토그래피의 경우 더 빨리 검출된다.
특정 파장대에서 흡광도는 Beer-Lambert 법칙에 의해 물질의 두께와 물질의 농도와 비례한다. 이때 검출기가 측정한 시료의 두께가 일 정하므로 검출기가 측정하여 방출된 전류를 시간에 대해 적분한 값은 농도에 선형적으로 비례하게 되어 흡광도를 통해 미지의 농도를 측정할 수 있는 것이다.
III. 실험방법 (Experimental)
-실험1 아데닌과 카페인의 분리
300μM 아데닌 용액과 500μM 카페인 용액을 260nm 파장에서 70μL 주입한 뒤 흡광도와 RT값을 측정한다.
-실험2 파장대에 따른 흡광도 측정
300μM 아데닌 용액과 500μM 용액을 1:1의 부피비로 혼합하여 70μL를 투입한 뒤 280nm, 270nm, 260nm, 250nm 순서로 파장대에 따른 흡광도와 높이를 관찰한다.
-실험3 미지의 카페인 용액 농도 측정
미리 준비된 500μM 카페인 용액을 통해 1:1로 희석하여 250μM을 제작한 뒤 250μM 과 500μM를 1:1로 희석하여 375μM 용액을 제조한다.
출처 : 해피캠퍼스