목차
Ⅰ. Introduction
Ⅱ. Materials & Methods
Ⅲ. Result
Ⅳ. Conclusion(Discussion)
Ⅴ. Reference
본문내용
IPTG란, Isopropyl-β-D-1-thiogalactopyranoside의 약기로 대장균 lactose operon의 효소합성을 유도하는 강력한 유도물질이다. 보통 유도물질은 operon의 활동에 의해 만들어지는 β-D-galactosidase에 의해 대사 이용하는 것이 많지만, IPTG는 분해되지 않아 비대사성 유도물질이라고도 불린다. 또한, 고농도로 사용시 galactoside permease가 없는 세포에도 투과할 수 있기 때문에 permease가 없는 균주에서의 유도실험에도 사용된다[1].
Tank buffer
전기영동장치에 채우는 Tank buffer에는 glycine과 Cl-(Tris-base)이온이 들어간다. Glycine은 아미노산의 성질로 인해 음전하를 띠거나 net charge가 0인 쌍극성 이온 형태로 존재한다. gel에 형성된 well에 단백질 시료를 가하고 전기영동을 시작하면 Cl-이온과 단백질, Glycine 이온이 모두 (+)극을 향해 출발한다. 그런데 glycine은 stacking gel의 낮은 pH에서 다시 평형을 이루어 일부가 쌍극성 이온이 되어버리기 때문에 이 부분에서 움직이는 이온이 없어지고, 결과적으로 전류가 감소한다. 그러나, 전체 gel의 전류는 유지되어야 하므로 이를 극복하기 위해서 Cl-이온과 glycine 사이에 매우 높은 전압차가 형성된다. 따라서, 상대적인 이동속도는 glycine<단백질