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  • 인천대학교 나노바이오실험(2) A+ 자료) 7. PLGA-doxorubicin 나노 입자를 이용한 세포 독성 평가

    목차

    1. Abstract

    2. Introduction

    3. Materials & Methods

    4. Results

    5. Discussions
    1) 같은 농도의 항암제가 포함된 나노 입자와 free doxorubicin의 독성을 비교했을 때, 왜 free doxorubicin에서 세포 독성이 더 높게 나타나는지 그 이유를 예측해보아라.
    2) 일반적으로 Doxorubicin과 같은 항암제는 장기간 사용 시 후천성 내성이 발현되어 약물의 암세포 내 유입을 감소시키고 약물의 필요를 증가시킨다. 암세포의 다수 약물에 저항성 (Multi-drug resistance, MDR)에 대해 조사하라.

    6. References

    본문내용

    이번 실험에서는 PLGA-doxorubicin 나노 입자를 이용하여 암세포 치료 효과를 다양한(0.04 ug, 0.16 ug, 0.3 ug) DOX 농도별로 평가하였다. 그리고 나노 입자를 통한 약물 전달과 free DOX를 통한 세포 치료 효과를 각각 비교해 보았다. MTT assay는 살아있는 세포에서만 환원 반응이 일어나는 MTT에 의한 세포 대사 활성을 평가하는 방법으로, 항암제를 투여하지 않은 배지와 농도별로 항암제를 처리한 배지의 UV 흡광도 값을 비교하여 세포의 생존 비율(cell viability)을 계산할 수 있다.
    실험 결과는 크게 두 항목으로 나눌 수 있다. 먼저, 각 DOX 처리하는 방법 별로 DOX의 농도의 변화에 따라 cell viability를 비교할 수 있다. DOX-PLGA NPs와 Empty PLGA NPs를 처리하였을 때는, DOX의 농도가 증가할수록 cell viability가 감소하였다. 반면 Free DOX를 처리하였을 때는, DOX의 농도가 변화해도 일정한 cell viability를 보였다. 두 번째로, 각 농도 별로 DOX의 처리 방법에 따른 cell viability를 비교해보았다. 0.04 ug의 DOX를 처리하였을 때는, Empty PLGA NPs, DOX-PLGA NPs, Free DOX 순으로 cell viability가 감소하였다. 0.16 ug의 DOX를 처리하였을 때는, Empty PLGA NPs, Free DOX, DOX-PLGA NPs 순으로 cell viability가 감소하였다. 0.3 ug의 DOX를 처리하였을 때는, Free DOX, Empty PLGA NPs, DOX-PLGA NPs 순으로 cell viability가 감소하였다.

    출처 : 해피캠퍼스

  • 인천대학교 나노바이오실험(2) A+ 자료) 4. PLGA-doxorubicin 나노 입자의 약물 봉입 효율 평가

    목차

    1. Abstract

    2. Introduction

    3. Materials & Methods

    4. Results
    1) 실험 결과에 drug encapsulation efficiency를 구하는 방법을 서술하고 값을 나타내라.

    5. Discussions
    1) PLGA 나노 입자의 drug loading efficiency를 향상시킬 수 있는 방법에 대해 토의하라.

    6. References

    본문내용

    이번 실험에서는 double emulsion 방법을 이용하여, 항암제인 doxorubicin(DOX)이 봉입된 PLGA 나노 입자를 제조하였다. 그리고 저번 실험을 통해 얻은 standard curve(y=0.0044x)를 이용하여, PLGA 나노 입자의 약물 봉입 효율(drug encapsulation efficiency)을 정량해보았다.
    Doxorubicin은 암 치료에 사용되는 약물이다. 유방암, 방광암, 백혈병, 림프종, 신경모세포종, 육종 등 많은 종류의 암을 치료하는 데 사용될 수 있다. Streptomyces peucetius 세균에서 유래하며, DNA에 손상을 입혀 암세포를 죽일 수 있다. DOX를 약물에 주입하면 drug delivery system에 의해 항암치료에 사용할 수 있다.

    출처 : 해피캠퍼스

  • 인천대학교 나노바이오실험(2) A+ 자료) 2. PVA 농도에 따른 PLGA 나노 입자의 크기 변화 관찰

    목차

    1. Abstract

    2. Introduction

    3. Materials & Methods

    4. Results

    5. Discussions
    1) PVA의 농도에 따른 PLGA 나노 입자의 크기와 zeta-potential이 어떻게 변하는지 그 경향성을 밝히고 그 이유를 써라.

    6. References

    본문내용

    Ⅰ. Abstract
    이번 실험은 저번 실험과 같이 이미 존재하는 PLGA[lactic acid: glycolic acid(65:35)] 분말을 사용해, W/O/W double emulsion method를 통해 methylene blue가 봉입된 nano particle이 형성되는 것을 확인하였다. 나아가 PVA 농도가 PLGA 나노 입자의 물리적 특성에 미치는 영향을 확인하기 위해, PLGA의 PVA 농도를 1%, 5%로 나누어 만들고 Dynamic Light Scattering(DLS)로 입자의 크기, PdI, Zeta-potential을 측정하였다.
    일반적으로 PVA의 농도가 증가할 경우, 입자들 간의 반발력이 커져 응집현상을 막아 나노 입자의 크기가 작아진다. 또한 zeta-potential의 절댓값은 나노 입자의 크기에 반비례한다. 하지만 이번 실험에서 우리 조의 결과는 PVA의 농도가 증가함에 따라 나노 입자의 크기는 증가하였고, zeta-potential의 절댓값은 증가하였다. 하지만 전체의 데이터를 분석했을 때는 PVA의 농도가 증가함에 따라 나노 입자의 크기는 감소하였고, zeta-potential의 절댓값은 증가하는 것으로 보인다.

    Ⅱ. Introduction
    – 실험 목표 : . W/O/W double emulsion 기법을 이용해서 methylene blue가 봉입된 PLGA 나노 입자를 만들고 PVA의 농도에 따른 나노 입자의 물리적 특성의 변화를 관찰한다.
    – 실험 원리
    1. W/O/W emulsion method
    오일이 물에 분산되거나 반대로 물에 오일이 분산된 것을 emulsion이라 한다. 물과 유기 용액을 매우 균일하게 섞어 o/w emulsion을 만든 후에 이를 다시 물에 넣어 균일하게 섞은 후에 유기 용매를 증발시켜 물 속에 분산되어 있는 나노 입자를 고체 상태로 얻는 방법이 w/o/w emulsion method이다.

    출처 : 해피캠퍼스

  • 인천대학교 나노바이오실험(2) A+ 자료) 1. PLGA 나노 입자의 합성과 수용성 약물 봉입 방법

    목차

    1. Abstract

    2. Introduction

    3. Materials & Methods

    4. Results

    5. Discussions
    1) PLGA의 합성법
    2) W/O/W emulsion method
    3) PLGA 나노 입자의 크기를 조절할 수 있는 방법

    6. References

    본문내용

    PLGA는 높은 생체 적합성과 생분해성, 가공성으로 Drug Delivery System(DDS) 등의 디바이스로 응용되고 있다. 이는 가장 효과적인 polymeric nano particle 중 하나로서, 미국 FDA에서는 몸속에서 오랜 시간 천천히 약물이 방출되는 controlled & sustained-release 특성과 낮은 독성, 조직과 세포에 대한 생체적합성을 가지고 있기 때문에 DDS로서 이를 사용할 수 있게 승인하였다. 하지만 낮은 세포 부착율과 큰 size가 DDS로 사용되는 데 불리하게 작용하기 때문에, 기존 PLGA 분말을 Nano size화 시켜서 DDS 효율을 개선할 수 있다. 이번 실험은 대표적인 생분해성 고분자인 PLGA의 구조적, 물리적 특성을 이해하는 것이다. 또한 PLGA를 이용하여 nanoparticles를 합성하고, 이에 수용성 약물을 봉입하여 약물전달체로써 만드는 것을 목표로 하였다.

    출처 : 해피캠퍼스