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  • 현대생물학실험4 cycloheximide chase assay full report

    목차

    1.Abstract
    2.Introduction
    3.Materials & Methods
    4.Data & Results
    5.Discussion
    6.Reference

    본문내용

    Cycloheximide는 진핵새포 내의 단백질 번역과정에서 단백질을 합성을 억제하는 물질이다. Cycloheximide를 이용해 단백질 합성을 억제한 후 기존에 존재했던 단백질이 분해되는 시간을 측정함으로써 단백질 half-life를 결정할 수 있다. 단백질이 분해되는 과정은 lysosome-autophagy pathway, ubiquitin-proteosome pathway 두가지로 나눌 수 있다. Protein half-life는 단백질의 세포과정에서 단백질 풍부도를 결정하거나 질병에 특이적 단백질 degradation을 연구하는데 중요한 역할을 한다. 세포를 배양한 후, 단백질 농도를 결정하고 똑같은 양의 단백질을 취한다. 이후, SDS-page – transfer – western blotting 과정을 거쳐 결과를 확인한다. Western blotting 결과를 바탕으로 image J 프로그램을 이용해 단백질 양을 측정하고 시간에 따라 감소된 단백질 양을 확인해본다. cyclinD1과 -tubulin 단백질량의 백분율을 구하여 시간 경과에 따라 cyclin D1의 양이 감소한 것을 확인하였다. Cycloheximide의 기전을 이용하여 protein-half life를 결정할 수 있는 이유에 대해 생각해보았고 비슷한 실험을 진행한 논문 결과와 이번 실험의 결과를 비교해보고 차이가 나는 이유에 대해서도 생각해보았다.

    출처 : 해피캠퍼스

  • 추출[유기화학실험 A+]

    목차

    1. Title
    2. Date
    3. Apparatus & Reagents
    4. Procedure
    5. Result
    6. Discussion
    7. Reference

    본문내용

    6. Discussion
    1) 실험에 관한 고찰
    이번 실험은 적절한 용매를 사용하여 혼합물로부터 물질을 추출하는 실험이었다. Benzoic acid, p-Chloroaniline, 4-methoxyphenol, naphthalene을 각각 1.5g씩 취한 후 30mL diethyl ether로 완전히 녹여서 혼합 용액을 제조하였다. 그리고 solvent로써 작용할 1.04M Sodium bicarbonate(NaHCO3), 2.5M Sodium hydroxide(NaOH), 4M Hydrochloric acid용액을 각각 250mL씩 제조하였다. 또한 추출 과정에서 층 분리가 잘 이루어지지 않을 경우 층 분리가 잘 되도록 하기 위해 첨가하는 포화 NaCl용액 100mL도 제조하였다. 이번 실험에서는 각 성분들의 pKa값의 차이에 의한 Acid/Base Extraction을 이용하여 혼합물에 들어 있는 성분을 추출하였다. 이때, 원하는 물질을 추출하기에 적합한 solvent를 선택해야하기 때문에 pKa값을 비교하여 반응의 진행방향을 예측하여 적절한 solvent를 선택하였다. 각 시료들의 추출이 끝난 후, 분리된 용액들을 중화시켜 시료들을 얻을 수 있었다. 최종적으로 vacuum filtration을 통해 원하는 시료들을 얻었다.
    우리 조가 가장 먼저 추출한 시료는 Benzoic acid였다. Benzoic acid를 추출하기 위해 1.04M Sodium bicarbonate(NaHCO3)용액을 solvent로 사용하여 추출을 진행하였다. Benzoic acid는 산이기 때문에 중화시키기 위해서 Sodium hydroxide용액을 사용할 수도 있지만 Sodium bicarbonate용액을 사용한 이유는 다음과 같다.

    출처 : 해피캠퍼스

  • A+ 유기화학실험1 < Extraction of Acids-bases > 레포트

    목차

    1. Title

    2. Purpose

    3. Theory
    1) Extraction (추출)
    2) Partition coefficient (분배계수, K)
    3) Drying agent
    4) Salting out
    5) Emulsion
    6) Thin layer chromatography (TLC)
    7) Acid-Base reaction

    4. Reagents & Apparatus
    1) Reagents
    2) Physical properties of chemical reagents
    3) Apparatus
    4) Apparatus set-up

    5. Procedure

    6. 실험 시 주의해야 할 사항

    7. Data & Results

    8. Discussion
    1) 실험 과정 분석
    2) 실험 결과 분석
    3) NaCl의 역할
    4) MgSO4의 역할
    5) 오차 분석 및 해결 방안 제시

    9. Conclusion

    10. References

    본문내용

    1. Title : Extraction of Acids-bases
    2. Purpose
    한 물질에서 어떤 성분을 분리하는 방법의 하나인 추출에 대하여 원리와 개념을 이해한다. 이를 실험에 적용하여 추출의 장점, 단점 및 효과적인 추출 방법을 알아본다.
    3. Theories
    1) Extraction (추출)
    혼합물에서 특정한 성분만 녹이는 용매를 사용하여 용해도 차이를 발생시켜 혼합물로부터 한 성분을 분리하는 방법이다. 일반적으로 물 층에 혼합된 유기 물질이 유기 용매에 잘 용해되는 성질을 활용하여 유기 용매 층으로 유기 물질이 이동하도록 만드는 과정을 말한다. 2) Partition coefficient (분배계수, K)
    용액에 혼합되지 않는 용매를 이용하여 추출을 진행할 때, 용액의 용질의 각 용매에 대한 용해도 차이에 의하여 두 용매에 분산된다. 평형을 이루었을 때, 두 용매에 녹은 용질의 농도 비율은 일정하게 유지된다. 이때의 농도 비율이 분배계수(K)이다. C1과 C2는 분리된 각 용액속에 존재하는 용질의 몰 농도로, C1에서 C2로 용질이 추출되는 경우이다. K  CC 분배계수를 이용하여 계산해보면, 같은 부피의 용매로 추출을 진행할 때, 한 번에 많은 양의 용매를 넣는 것보다 적은 양으로 여러 번 추출을 진행하는 것이 더 효율적임을 확인할 수 있다.
    3) Drying agent
    Drying agent는 물질에 포함된 수분을 제거해 물질을 건조 시킬 때 사용되는 화합물이다. Agent는 수분을 제거하는 방법에 따라 화학적 작용을 하는 것과 물리적 작용을 하는 것으로 구분할 수 있다. 화학적 작용을 하는 drying agent는 수분과 반응하여 결정수 형태로 흡수함으로써 수분을 고착화하는 기능이 있으며, 그 예로는 염화칼슘, 황산구리 등이 있다. 물리적작용을 하는 drying agent는 수분을 흡수, 흡착하는 기능이 있으며, 그 예로는 실리카 겔, 알루미나(산화 알루미늄), 제올라이트가 있다.

    출처 : 해피캠퍼스

  • Adherent Cell lysis for Protein extraction A+레포트입니다.

    목차

    1. Title
    2. Date
    3. Name
    4. Purpose
    5. Materials
    6. Methods
    7. Results
    8. Discussions
    9. Project
    10. Reference

    본문내용

    1. Title
    Adherent Cell lysis for Protein extraction

    2. Date

    3. Name

    4. Purpose
    Cell lysis (or cellular disruption)에 사용되는 여러 가지 물리적, 화학적 방법을 알아본 후, RIPA lysis buffer를 사용하여 세포를 파괴하고 cellular protein을 얻을 수 있다.

    5. Materials
    MCF-7 Cells (cultured in 60㎜ dish), Ice cold DPBS, Ice cold RIPA lysis buffer, micropipette, tip, rack, beaker, cell scraper, ep-tube, centrifuge, ice, tissue, 70% ethanol

    6. Methods
    ① Micropipette으로 media를 제거한다.

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