목차
1. 실험 일시 및 장소
2. 실험 도구
3. 이론
4. 실험 목표
5. 실험 방법
6. 결과
7. 고찰
8. 출처
본문내용
2. 실험 도구
– 실험 기자재 : 마이크로 피펫 & 마이크로 피펫 팁, EP tube , tube rack, 라텍스 장갑, microwave, UV lamp, 전기영동장치, shaking incubator, vortex mixer, centrifuge, 스티로폼 박스, 삼각플라스크
– 시약 : Plasma DNA, Not Ⅰ, Hind Ⅲ, 10X fast cut buffer, DNA marker, DW, agarose powder, TAE buffer, 6X loading dye, gel electrophoresis buffer, EtBr, ice
3. 이론
① Restriction enzyme
세균이 바이러스 등 외부에서 온 DNA를 절단하여 배제시키기 위해서 가지고 있는 일종의 자기방어효소이다. DNA의 염기 서열의 특정 부분만을 가수분해하는 성질을 가진 것으로, 유전공학에서 유용한 수단으로 이용될 수 있다. 제한효소는 이들의 조성과 필요로 하는 효소 보조인자, 이들이 작용하는 서열에 따라 크게 4개의 그룹으로 나눌 수 있다. 모든 제한효소는 DNA 내부에 존재하는 짧은 서열을 인지하여 작용한다.
Type Ⅰ의 경우 제한효소와 메틸화효소가 뭉쳐져 있고, 인식자리와 제한자리가 서로 다르다. 염기서열은 특이적으로 인식하지만, 인식자리에서 약 1000개 염기 정도 떨어진 곳에서 비특이적으로 DNA를 자른다. 또한, 활성에 ATP나 S-아데노실메티오닌, Mg2+ 등을 필요로 한다. DNA 절단 위치의 특이성이 없기 때문에 실험 목적으로는 거의 사용하지 않는다.
Type Ⅱ는 인식자리가 특이적이고 제한자리 또한 주변의 염기로 특이적으로 작용한다. 실험실에서 주로 사용하는 것이 이 유형이다.
출처 : 해피캠퍼스