지식참고자료

[태그:] Transformation

  • E.coli_transformation_형질전환 실험보고서

    목차

    1. Transformation의 원리
    (1) 형질전환의 시작
    (2) 형질전환의 메커니즘
    (3) E.coli의 형질 전환(transformation)

    2. 실험재료

    3. 실험방법
    (1) competent cell 제조
    (2) transformation 방법

    4. 실험결과

    5. 실험고찰

    6. 참고문헌

    본문내용

    형질전환은 외부로부터 주어진 DNA에 의하여 생물의 유전적인 성질이 변하는 일을 말한다. 형질전환은 1928년 영국의 F.그리피스가 폐렴쌍구균(肺炎雙球菌)을 이용하여 실시한 실험이 계기가 되어 발견되었다. 다당류로 이루어진 두꺼운 막, 즉 협막(莢膜)을 가진 S형균으로부터 DNA를 추출하여 이것을 다당류성 협막을 가지지 않은 R형균에 작용시키면 R형균의 일부가 S형균으로 변한다. 이것은 S형 세균의 DAN가 R형 세균 속에 들어가서 유전자 발현을 하기 때문이다. 전환을 일으키는 데 필요한 DNA의 최소량은 약 10만분의 1 mol이며, DNA의 single strand를 주는 것보다도 double strand를 주는 쪽이 전환을 일으키기 쉽다. 형질전환 실험에 의하여 유전자의 본체가 DNA라는 것이 밝혀졌다. 그러나 고등생물에 있어서도 세균류에서 볼 수 있는 것 같은 형질전환이 일어나는지 어떤지는 아직 밝혀지지 않았다.

    출처 : 해피캠퍼스

  • 미생물학 transformation 형질전환 실험 레포트

    목차

    1.실험제목(title)
    2.실험날짜(date):
    3.실험목적(purpose):
    4.실험 준비물(material-reagent, instrument)
    5.실험 방법(method)
    6.실험 결과(result)
    7.실험 고찰(discussion): 실험에 대한 고찰도 추가하기
    8.참고문헌(reference)

    본문내용

    실험제목(title): Transformation
    · 실험날짜(date):
    · 실험목적(purpose): plasmid DNA를 competent cell에 도입하여 colony를 관찰함으로써 transformation과정을 이해한다.
    · 실험 준비물(material-reagent, instrument)
    피펫, LB agar 배지, spreader, DH5 alpha, 항온수조, 얼음수조, e-tube, dilution한 DNA

    · 실험 방법(method)
    ① DH5 alpha를 얼음이 담긴 수조에 두고, e-tube를 얼음에 두어 차갑게 유지한다.
    ② 20μl의 DH5 alpha를 e-tube에 넣는다.
    ③ DNA 2μl을 DH5 alpha에 넣는다. (최대한 competent cell이 충격을 받지 않도록 주의한다.)
    ④ 얼음에서 30분간 incubation한다.
    ⑤ 42℃에서 90sec간 incubation한다.
    ⑥ 얼음에서 5분간 incubation한다.
    ⑦ 37℃에서 데운 항생제가 들어있는 LB agar 배지에 competent cell 20μl을 넣고 spreading한다.
    (control group)
    ⑧ 37℃에서 데운 항생제가 들어있는 LB agar 배지에 transformation한 dna를 20μl 넣고 spreading한다.
    ⑨ 37℃에서 overnight으로 배양한다.

    · 실험 결과(result)

    · 실험 고찰(discussion): 실험에 대한 고찰도 추가하기
    competent cell은 온도와 충격에 민감하므로 실험 시 주의해서 다뤄야한다. 또한 배지에 spreading시 배지가 파이지 않도록 조심해서 다뤄야 한다.

    출처 : 해피캠퍼스