[화학과 수석의 A+ 레포트][조교피드백 포함] 박테리아의 형질전환 (생화학실험)

목차

1. 실험 목적
2. 이론
3. 실험 시약 및 기구
4. 실험 방법
5. 실험 결과
6. 고찰

본문내용

1. 실험 목적
이번 실험에서는 플라스미드와 박테리아를 이용해 형질 전환한다.

2. 이론
클로닝이란 똑같은 DNA 조각을 여러 개 만들어 내는 것을 말한다. 관심있는 dna를 많이 만 들어내기 위해서는 copy machine 역할을 해줄 수 있는 박테리아를 안에 집어넣어야 한다. 박테리아에 관심있는 DNA 조각을 집어넣고 키우면 박테리아를 여러 개로 만들어 관심있는 DNA도 여러개 만들 수 있게 된다. 유전자 clone은 같은 DNA가 여러 개 있는 것을 의미하 며, 클로닝의 목적은 재조합 dna를 만들어서 양을 증폭시키는 데에 있다.

박테리아가 원래 가지고 있는 DNA 조각을 자르고 관심 있는 DNA 조각을 넣어주는데, 이때 DNA 특정서열을 잘라주는 제한효소를 사용한다. 잘린 DNA 조각은 ligase 효소가 합쳐준다( ligation 단계). 그리고 관심있는 DNA를 가진 벡터를 박테리아 안에 넣어준다 (transformation 단계-우리 실험에서 진행하는 단계이다.) 박테리아를 키워 culturing하면 박테리아가 많아져 관심있는 DNA도 많아진다(여기서 culturing은 특정 생물체를 인위적으로 배양하고 기르는 행위를 의미한다.) 관심있는 DNA를 가진 벡터가 들어간 박테리아는 항생제 에 살아남을 수 있고, 들어가지 않은 박테리아는 항생제에 살아남을 수 없다. 따라서 항생제 가 들어간 배지에서 박테리아를 키우면 관심있는 DNA를 가진 벡터만 살아남을 수 있게된다. 살아남은 박테리아만 키워서 clone을 만들면 최종적으로 복제시키고자 했던 DNA를 가진 박 테리아를 많이 얻을 수 있게 된다.

관심있는 DNA 조각은 대표적으로 genomic library나 cdna library를 통해 가져올 수 있다. genomic library는 전체 유전체(genome)를 포함하는 DNA 단편들을 모아놓은 library이고, cdna library는 rna로부터 역전사시킨 dna만 모아놓은 library다.

출처 : 해피캠퍼스