목차
1. Introduction
2. Materials
3. Methods
4. Result
5. Discussion
6. Reference
본문내용
(1) Immunoprecipitation (면역침강법, IP)
면역침강법이란 항원-항체 반응을 이용하여 원하는 단백질을 분리하고자 하는 실험이다.
단백질은 특정한 항체에만 결합하는 항체 특이성을 가지고 있다. 따라서 검출하고자하는 target protein 또한 특정한 종류의 항체와만 결합하게 된다. 항원-항체 복합체가 바닥에 가라앉도록 하기 위해서 먼저 항체와 Bead 를 붙이고, bead 와 결합한 항체가 다시 단백질과 결합하여 단백질-항체-Bead 복합체를 형성하게 된다. 이 복합체가
원심분리를 통해 침강하게 되면서 원하는 단백질을 분리할 수 있는 것이다.
① Antibody (항체)
항체는 항원과 특이적으로 결합하는 물질이다. 항체는 중심에 두 가닥의 heavy chain 과 주변에 각각 한 가닥의 light chain 을 가지고 있다. 전체적으로 항원과 직접적으로 결합하는 부위인 antigen binding site 와 중심 기둥이 되는 Fc domain 으로 나눌 수 있는 형태를 가진다. 생체 내에는 다양한 항체를 가지는데, 이번 Immunoprecipitation 실험 과정에서 사용될 항체는 Ig G 이다.
Ig G 항체는 감염 시에 면역 반응 과정에서 주로 사용되는 항체이며, 면역 반응 초기에 생성되는 항체인 Ig M 이 면역 반응 과정에서 Ig G 로 바뀌어서 생산된다.
② Protein Tagging
Protein Tagging 은 검출하고자 하는 목표 단백질에 인위적으로 합성한 아미노산 배열 집단을 붙이고, 이 아미노산에 결합하는 항체를 loading 하여 목표 단백질을 검출하고자 한다. 이렇게 tagging 된 단백질만을 세포에서 인위적으로 배양시키면 용액 내의 여러 단백질들 중 원하는 단백질만을 얻을 수 있다
출처 : 해피캠퍼스
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